《表1 大鼠细胞因子抗体芯片》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《胶原诱导性关节炎病/证模型大鼠血清细胞因子表达谱的初步研究》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

正常组大鼠及造模后大鼠于首次免疫后第44天，禁食不禁水12 h，腹主动脉采血，3500 r/min离心10 min，分离血清。每只大鼠取血清50μL，组内混匀，应用RayBio大鼠炎症细胞因子抗体芯片检测34个细胞因子，主要步骤:（1）封闭和孵育:将抗体芯片放入试剂盒提供的反应盒中，在每个芯片孔中加入100μL的1×封闭液，室温孵育30 min。去除封闭缓冲液，每个孔中加入相应的样品100μL，4℃过夜孵育；去除过量的样品溶液，用不同的洗膜液分别洗玻片。将生物素标记抗体加入相应孔内，每孔70μL，室温孵育2 h，重复洗膜。每孔加入70μL的1500倍稀释的荧光剂-链霉亲和素，室温孵育2 h，重复洗膜。（2）荧光检测:待玻璃芯片完全晾干后用激光扫描仪进行扫描，图像以图片文件保存，荧光信号数据储存为Microsoft Excel文件。芯片膜上细胞因子名称及位置见表1。将各点测得的原始灰度值除以芯片中的6个阳性对照点平均值，得出标准化后的灰度值，各组间比较，得出表达升高或降低倍数，比值小于0.66或大于1.5者认为有明显差异。