《表1 GL-PPSQ2甲基化分析》

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《灵芝多糖肽GL-PPSQ_2结构研究及其应用》

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参考文献报道的方法[8]进行实验分析。干燥的GL-PPSQ2溶于无水DMSO（0.5 m L）中，然后加入干燥的NaOH（20 mg）并将混合物在室温下搅拌3 h，搅拌2.5 h加入0.3 mL甲基碘进行甲基化。甲基化多糖用3 mL二氯甲烷萃取，然后通过氮气流蒸发。IR光谱中-OH带（3 200～3 700 cm-1）消失证实了完全甲基化。甲基化多糖用0.5 m L 4.0mol/L三氟乙酸（TFA）在100℃水解6 h。在室温下用硼氢化钠（3 mg）还原水解产物12 h，然后在100℃下用乙酸酐（0.5 mL）乙酰化2 h。所得部分甲基化的糖醇乙酸酯（PMAA）通过GC-MS分析（30 m×0.25 mm，0.25μm）的DB-5MS柱（Thermo Finnigan TRACE 2000/MS），以180～270℃，20℃/min的速率程序升温，在270℃保温25 min。通过GC中的质谱和相对保留时间鉴定PMAA的个别峰和碎裂模式，将甲基化糖的百分比估计为峰面积的比率。甲基化分析结果表明多糖GL-PPSQ2中存在6种葡萄糖残基，其糖苷键类型和物质的量比见表1。