《表2 方阵滴定结果 (OD450 nm值)》

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《禽流感病毒H7亚型竞争ELISA抗体检测方法的建立》


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使用方阵滴定试验摸索包被抗原和酶标抗体的稀释滴度。将抗原按1∶400、1∶800、1∶1 000、1∶1 200、1∶1 500、1∶2 000、1∶2 500、1∶3 000进行稀释,分别加入到酶标板的第1~8行,每个稀释度加1行,每孔100μL。将酶标记抗体按1∶400、1∶600、1∶800、1∶1 000、1∶1 200、1∶1 500进行稀释,分别加入酶标板的第1~6列/7~12列,每个稀释度加1列,每列100μL。按照竞争ELISA的常规步骤进行操作[7],方阵滴定结果见表2。当抗原1∶1 000稀释、酶标记物1∶1 000稀释时,阳性对照PI值最大,因此,选择抗原最佳包被浓度为1∶1 000稀释(每孔抗原包被量含量为2μg/m L)、酶标记物最佳稀释倍数为1∶1 000,其N/P值最大(表3)。