《表1 抗原、抗体的浓度选择(OD450nm)》

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《一种多菌灵酶联免疫快速检测方法的建立》


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测定浓度为0.0,0.1μg/L的多菌灵标准品的吸光度值(见表1),根据式(1)计算B(0.1μg/L)/B0(0.0μg/L)的百分吸光率。理论上在抗原数量一定的情况下,抗体只有达到一定数量才能有效结合,然而实际应用中,抗原和单克隆抗体作为制备酶联免疫试剂盒的最关键原料,理想情况是在能够保证有效反应的情况下,抗体量最小;稀释倍数越大,同样产量的原料能够制备的试剂盒就越多。根据已有的研究[21],如果能够达到B(0.1μg/L)/B0(0.0μg/L)的百分吸光率在70%~85%的要求,那么稀释倍数越大,原料就能节省得越多。因此,选择抗原稀释倍数为8 000,单克隆抗体稀释倍数为80 000。