《表1 HA01/o2赖氨酸含量检测》

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《郑58/opaque2近等基因系中opaque2基因突变位点分析与高效分子标记开发》

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注:表中数值为每种氨基酸检测值与氨基酸总和的百分比（w/w×100）。

以O2缺失位点作为扩增区域，O2基因序列为模板，设计引物o2-indel-1，检测郑58/o2、郑58、昌7-2以及优良自交系HA01之间的多态性。结果显示，o2-indel-1引物扩增片段在郑58/o2与其他自交系之间呈多态性，郑58/o2由于缺失10 bp扩增片段较小，郑58、昌7-2和HA01扩增片段较大，且大小一致（图7）。利用引物o2-indel-1对郑58/o2供体和受体材料HA01构建回交群体BC1F1，苗期取样进行分子标记选择，共检测100株。选择杂合基因型植株进行下一次回交，每次回交群体均利用引物o2-indel-1进行分子标记选择。利用分子标记o2-indel-1在BC5F2群体中选择o2o2纯合基因型植株，并自交5代。HA01构建的BC5F5群体，PCR检测结果显示，所有植株均为o2o2纯合基因型，说明已经转育成o2o2纯合基因型近等基因系。HA01/o2近等基因系子粒赖氨酸含量为0.39%～0.52%（表1）。子粒醇溶蛋白检测结果显示，22kD醇溶蛋白条带表达量下降。由于引物扩增区域包含o2基因突变位点，标记与突变表型完全连锁（图8）。