《Table 1.Presenting features of myeloma patients at diagnosis》

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《姜黄素通过抑制Notch1信号通路增强多发性骨髓瘤对硼替佐米的化疗敏感性》


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M:male;β2-MG:β2-microglobulin;D-S Stage:Durie-Salmon system;ISS:International Staging System.

无菌操作下取骨髓液5 ml,肝素抗凝。加入5 ml无菌PBS溶液至骨髓液中,混匀。将混合液沿离心管壁缓慢加入到装有10 ml淋巴细胞分离液的离心管中,保持界面分明。2 000×g离心20 min,小心吸取上清及白膜层至含5 ml无菌PBS的离心管中,2 000×g离心10 min,弃上清。加入5ml无菌PBS重悬后,2 000×g离心10 min,弃上清,计数细胞。将细胞悬于buffer中,每2×107细胞加80μl buffer。每2×107细胞加20μl CD138 Microbeads,混匀,4℃避光孵育15 min。每2×107细胞加1-2ml buffer混匀,300×g离心10 min,弃尽上清。重悬细胞于500μl buffer中。安装分选装置,将磁柱置于磁铁上。用500μl buffer润湿磁柱后,将细胞悬液加入磁柱中,收集滴落的液体,重复加入500μl buffer洗脱3次,收集所有滴落的液体,所含的细胞即为CD138-的细胞。将磁柱移至新的收集管上方,加入1 ml buffer,使用活塞下压收集液体,所含细胞即为CD138+细胞。将收集的CD138-细胞和CD138+细胞1 000×g离心10min,弃去液体,用含有10%胎牛血清RPMI 1640完全培养液重悬培养。