《表1 PCR引物信息:回捕牙鲆生长和摄食状况调查研究》

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《回捕牙鲆生长和摄食状况调查研究》


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(2) 线粒体DNA COI基因片段扩增。鱼类和虾蟹类使用的引物名称、引物序列、退火温度等见表1,引物由上海生工生物工程技术有限公司合成。PCR反应体系为20μL,包括dH2O 7.4μL,2×Es Taq MasterMix 10μL,上下游引物(10 pmol·μL-1)各0.3μL,DNA模板2μL。PCR反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性45 s,52℃复性45 s,72℃延伸45 s,共35个循环;最终72℃延伸10 min。取2μL PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳检测,使用回收试剂盒对目的条带进行回收和纯化,之后送生物公司进行正反链测序。