《表2 CLH反应缓冲液配方 (1 L)》

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《小麦叶绿素酶及脱镁叶绿素水解酶活性测定条件的优化》


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向10 m L试管中加入CLH反应缓冲液1 m L(表2)、20μg/m L的底物叶绿素a溶液0.4 m L和粗酶液0.6 m L,混匀后黑暗条件下35℃水浴中反应40 min后,立即加入1 m L终止液(10 mmol/L KOH),然后加入-20℃预冷的冷丙酮4 m L、正己烷6 m L[21-23]。10 000×g,4℃离心5 min,取下层丙酮相,在667 nm下测定产物脱植基叶绿素a的吸光度(OD值),消光系数为76.79 L/(mmol·cm)[24]。