《表1 培养基配方:一株嗜麦芽寡养单胞菌的分离及其生物学特性》

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《一株嗜麦芽寡养单胞菌的分离及其生物学特性》


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(1) 土壤浸出液:土壤50.00 g,去离子水1 L,pH自然,混匀后用四层纱布粗滤,4℃,10 000 r/min离心1 min,取上清液于4℃冰箱保存备用。(2)本实验所设计4类培养基配方详见表1,具体配制过程如下:1、2号培养基灭菌前成分相同,即只含土壤浸出液,因此将1×105 Pa灭菌的土壤浸出液与0.22μm微孔滤膜过滤除菌的土壤浸出液等体积混合后,倒板;3号培养基灭菌前为使用土壤浸出液配制2%LB:胰蛋白胨0.20 g,酵母提取物0.10g,NaCl 0.20 g,土壤浸出液1 L,pH自然,1×105Pa灭菌20 min,待培养基冷却至50-60℃与0.22μm微孔滤膜过滤除菌土壤浸出液等体积混合,倒板;4号培养基灭菌前为使用去离子水配制1%LB:胰蛋白胨0.10 g,酵母提取物0.05 g,NaCl 0.10 g,去离子水1 L,pH自然,1×105 Pa灭菌20 min,倒板。(3)2.27 mol/L丙酮酸钠溶液:丙酮酸钠0.25 g,去离子水1 mL,0.22μm微孔滤膜过滤除菌,吸取100μL涂布于对应培养基平板上,使涂布平板最终含有0.125%的丙酮酸钠。(4)1×107 U/L过氧化氢酶溶液:过氧化氢酶2.00 g,0.05 mol/L磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液1 L,pH 7.0,0.22μm微孔滤膜过滤除菌,吸取200μL涂布于对应培养基平板上,使涂布平板最终含有2 000 U的过氧化氢酶。(5)CAS检测培养基[11]。(6)干酪素培养基:干酪素10.00 g,琼脂15.00 g,去离子水1 L,pH 7.4。(7)产蛋白酶细菌发酵培养基:干酪素10.00 g,去离子水1 L,pH 7.4。上述(5)-(7)培养基1×105 Pa灭菌20 min。