《表1 抗生素的梯度洗脱程序》

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《农用地土壤抗生素组成特征与积累规律》

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称取2 g土壤样品到50 m L离心管中，用8 m L提取液（甲醇/EDTA-McIlvaine缓冲液，体积比为1/1）通过涡旋彻底混合5 min.然后将样品在3 800r·min-1离心5 min.用0.22μm滤膜过滤上清液1m L，用HPLC-MS/MS进行抗生素的识别与定量测定.HPLC-MS/MS系统（Agilent technologies，USA）由1200系列液相色谱仪组成，该液相色谱仪与配备有电喷雾电离界面（ESI）的三重四极杆质谱仪（6410 Triple Quad）偶联.通过HPLC反相C18柱（50 mm×2.1 mm×3.5μm，Agilent technologies，USA）分离10种目标抗生素.色谱柱温保持在30℃，进样量为5μL，流速为0.3 m L·min-1.流动相A为甲醇，流动相B为0.1%甲酸水溶液，采用梯度洗脱程序，程序设置如表1所示.10种抗生素标准曲线线性方程的R2均大于0.99.