《表1 各病毒的特异性引物序列》

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《烟草4种病毒的多重RT-PCR检测方法构建》

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使用DNAMAN 6.0软件比对Gen Bank中多条TMV、CMV和PVY外壳蛋白序列，以及TVBMV的全基因组序列，选择序列保守区域。使用Oligo6.0软件设计引物。引物设计要求目的片段的长度尽量在200～800 bp，长度不宜太接近，以免难以通过琼脂糖电泳进行区分。所得引物通过BLAST比对确保引物特异性良好。引物序列见表1。