《表1 引物序列:棉花不同部位主茎叶对脱叶剂噻苯隆的响应及机理》

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《棉花不同部位主茎叶对脱叶剂噻苯隆的响应及机理》


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棉花培养至10叶期用4.54 mmol·L-1TDZ均匀涂抹棉花功能叶倒4叶与幼叶(倒1叶),以涂抹清水为对照。在处理后0、3、6、12、24 h对功能叶及幼叶进行取样,设3个生物学重复,每个重复为3株植株的混样。用北京艾德莱公司生产的EASYspin植物RNA快速提取试剂盒提取RNA,Takara公司的M-MLV反转录试剂盒合成c DNA。根据NCBI数据库中Gh ACS1、Gh ACO1、Gh EIN3和Gh ERF 23基因的CDS序列设计q RT-PCR (Quantitative real-time polymerase chian reaction)特异性引物(表1),以Ghactin9基因为内参。q RT-PCR扩增程序为:95℃30 s,95℃5 s,60℃34 s,40个循环。采用2-△△CT方法计算基因表达量[13]。