《表3 实验方案设计：不同pH下低浓度芘对微囊藻生长和产毒的影响》

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《不同pH下低浓度芘对微囊藻生长和产毒的影响》

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试验所用的铜绿微囊藻取自中国科学院水生生物研究所淡水藻种库，藻液用BG11培养基培养，培养基组成如表1所示，其中A5溶液成分如表2所示。培养液及器皿均经高温灭菌消毒，实验容器为250 m L锥形瓶，每个瓶中加入藻液150 m L。实验方案见表3，实验在不同的p H值条件下进行，铜绿微囊藻适宜的p H为8～9[21]，为研究铜绿微囊藻在弱酸、中性及弱碱水体中的生长情况，根据预实验（p H分别设定为5.0、6.0、7.0、8.0、9.0）所得铜绿微囊藻适宜生长条件，设置p H梯度为5.0，7.0，9.0[22]。使用10%HCl溶液和10%Na OH溶液调节培养基p H值为p H=5.0（±0.1）、p H=7.0（±0.1）、p H=9.0（±0.1）。每个p H值设置一个对照组，每组实验设置3个平行组。将芘溶于丙酮配成浓度为0.001 5 mg/L的母液，经0.22μm滤膜灭菌过滤后加入培养基[23]。多环芳烃溶于甲醇中浓度低于0.01%时不影响铜绿微囊藻的生长[11]。培养基中的浓度设置旨在模拟中国湖泊的多环芳烃水平[24]。通过每天定时测定藻液光密度值来了解芘对铜绿微囊藻的生长影响情况。培养第5天，测定藻液的叶绿素a含量[25]，观察不同p H条件下低浓度芘对铜绿微囊藻的生长影响情况。培养第7天，测定藻毒素，进行不同p H条件下铜绿微囊藻在低浓度芘胁迫下的细胞内、外毒性分析。