《表1 突触可塑性相关基因引物序列》

《表1 突触可塑性相关基因引物序列》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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采用Trizol提取海马中总m RNA,按照反转录试剂盒说明书进行反转录合成c DNA第一链。采用荧光定量PCR扩增仔鼠海马突触可塑性相关基因PSD95、大脑发育调节脑蛋白(developmentally regulated brain protein,Drebrin)和突触素(Synaptophysin,SYN),按照荧光PCR扩增试剂盒(TAKARA,DRR039A)说明书操作,计算m RNA表达量。引物序列如表1所列;扩增的反应体系总体积为20μl,其中引物浓度为0.4μmol/L,模板量为5μl;扩增条件:95℃预变性30 s、95℃变性5 s、60℃退火和延伸34 s,40个循环。分别扩增同一样本的目的基因和看家基因(β-actin),利用其ΔCt值进行相对定量。即每个样本目的基因的Ct值减去该样本看家基因的Ct值得到ΔCt值,再用处理组的ΔCt值减去对照组的ΔCt均值等到ΔΔCt,2-ΔΔCt即为该基因m RNA的相对表达量。