《表1 突触可塑性相关基因引物序列》
采用Trizol提取海马中总m RNA,按照反转录试剂盒说明书进行反转录合成c DNA第一链。采用荧光定量PCR扩增仔鼠海马突触可塑性相关基因PSD95、大脑发育调节脑蛋白(developmentally regulated brain protein,Drebrin)和突触素(Synaptophysin,SYN),按照荧光PCR扩增试剂盒(TAKARA,DRR039A)说明书操作,计算m RNA表达量。引物序列如表1所列;扩增的反应体系总体积为20μl,其中引物浓度为0.4μmol/L,模板量为5μl;扩增条件:95℃预变性30 s、95℃变性5 s、60℃退火和延伸34 s,40个循环。分别扩增同一样本的目的基因和看家基因(β-actin),利用其ΔCt值进行相对定量。即每个样本目的基因的Ct值减去该样本看家基因的Ct值得到ΔCt值,再用处理组的ΔCt值减去对照组的ΔCt均值等到ΔΔCt,2-ΔΔCt即为该基因m RNA的相对表达量。
图表编号 | XD00218572300 严禁用于非法目的 |
---|---|
绘制时间 | 2020.12.25 |
作者 | 杨永存、何开武、李浩、何建凡 |
绘制单位 | 深圳市疾病预防控制中心、深圳市疾病预防控制中心、深圳市疾病预防控制中心、深圳市疾病预防控制中心 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |