《表2 实验所需引物序列:苯磷硫胺对饲喂高糖饲料团头鲂血浆生化指标及肝糖脂代谢的影响》
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《苯磷硫胺对饲喂高糖饲料团头鲂血浆生化指标及肝糖脂代谢的影响》
团头鲂肝组织RNA提取及其目的基因PCR分析,参照先前实验操作流程[9]。具体流程如下:组织RNA的提取过程严格参照Takara?Plus RNA Purification (Invitrogen货号:12183-555)试剂盒说明书进行。同时,使用Prime Script?RT reageat Kit反转录试剂盒并按照说明书要求进行c DNA反转。随后,根据Ta Ka Ra TB Green Premix Ex TaqTM试剂盒要求对目的基因进行荧光定量PCR检测,其20μL反应体系分别包含c DNA稀释液2μL,SYBR?Premix Ex TaqTM II 10μL,ROX Reference Dye II 0.6μL,上游引物0.2μL,下游引物0.2μL和dd H2O 7μL。最后,使用ABI Quantstudio?DX实时定量PCR仪(Life Technologies公司)进行荧光定量检测。期间,选择团头鲂内参引物EF1α(序列号:X77689.1)对目的基因(表2)的Ct值进行均一化处理,使用2–ΔΔCt法计算组织样品中m RNA的相对表达量。
图表编号 | XD00218125700 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2021.02.01 |
作者 | 徐超、刘文斌、李远友、谢帝芝、丁志荣、李向飞 |
绘制单位 | 华南农业大学海洋学院、南京农业大学动物科技学院江苏省水产动物营养重点实验室、华南农业大学海洋学院、华南农业大学海洋学院、华南农业大学海洋学院、南京农业大学动物科技学院江苏省水产动物营养重点实验室 |
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