《表1 变电检修内容:重组鸭瘟病毒载体中筛选高效表达鸭坦布苏病毒E蛋白启动子》
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《重组鸭瘟病毒载体中筛选高效表达鸭坦布苏病毒E蛋白启动子》
加粗序列分别与位于DEV US7和US8基因间插入位点上、下游序列同源,用于引入同源重组臂;下划线部分与pEP-pro-Es上序列同源;斜体部分为引入酶切位点
采用表1引物进行PCR扩增获得的p CAG、p SV40、p RSV、pg B(MDV)和p1.8k(MDV)基因,在5′和3′端分别引入了酶切位点,将片段用对应的酶进行双酶切之后插入到p EP-BGH-Es相应的酶切位点中,从而分别用p CAG、p SV40、p RSV、pg B(MDV)和p1.8k(MDV)替换p EP-BGH-Es上的p CMV启动子,构建不同启动子调控Es基因的质粒。通过PCR和酶切鉴定筛选获得阳性克隆,送上海博尚生物公司测序,获得阳性克隆分别命名为p EP-p CAG-Es、p EP-p SV40-Es、p EP-p RSV-Es、p EP-pg B(MDV)-Es和p EP-p1.8k(MDV)-Es(总称为p EP-pro-Es)。
图表编号 | XD00217317800 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.12.16 |
作者 | 陈柳、倪征、余斌、华炯钢、叶伟成、云涛、刘可姝、朱寅初、张存 |
绘制单位 | 浙江省农业科学院畜牧兽医研究所、浙江省农业科学院畜牧兽医研究所、浙江省农业科学院畜牧兽医研究所、浙江省农业科学院畜牧兽医研究所、浙江省农业科学院畜牧兽医研究所、浙江省农业科学院畜牧兽医研究所、浙江省农业科学院畜牧兽医研究所、浙江省农业科学院畜牧兽医研究所、浙江省农业科学院畜牧兽医研究所 |
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