《表1 PCR-SSP引物序列》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《孕妇RhD基因表达对新生儿溶血病的诊断价值》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

取孕妇肘静脉血5 ml，采用EDTA-Na2抗凝，生理盐水洗涤红细胞后配制成5%红细胞悬液备用。在试管中加入50μl红细胞悬液和100μl Ig M型单克隆抗-D试剂，离心15 s后观察。采用QLAamp DNA提取试剂盒提取孕妇血浆DNA，试剂盒由北京华夏远洋科技有限公司提供，参照试剂盒说明进行。参照文献设计Rh D基因引物序列[7]，见表1。Y染色体性别决定区基因扩增:扩增反应体积50μl，PCR 10×bμffer 5μl，DNA模板溶液5μl，Taq酶2μl，d NTP浓度为0.2 mmol/L，Mg CL2为2.0 mmol/L，上下引物浓度为0.2 mmol/L，以β-globin基因序列特异性引物为DNA参考。Rh D外显子PCR反应条件:95℃预变性5 min，60℃退火30 s，72℃延伸90 s，共30个循环，冷却至4℃。取5μl PCR扩增产物点样至琼脂糖凝胶电泳孔，以10 V/cm进行电泳处理。