《表1 GRS方法的步骤：循环肿瘤细胞在乳腺癌诊治中的应用》

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《循环肿瘤细胞在乳腺癌诊治中的应用》

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CTCs:循环肿瘤细胞；RT-PCR:逆转录-聚合酶链反应；Ep CAM:上皮细胞黏附分子；EMT:上皮-间充质转化

理想的检测方案需要有效、准确、迅速地检测并分离存在于大量正常细胞中的肿瘤细胞。CTCs分选是各种CTCs检查的第一步，通过阳性或阴性筛查和富集，而后鉴定并区分CTCs和正常细胞。应用CTCs特异性表达的上皮型标志物[如上皮细胞黏附分子（epithelial cell adhesion molecule，Ep CAM）、上皮钙黏素、细胞因子]和间质型标志物（如神经钙黏素、波形蛋白和锌指转录因子蛋白），不仅可以对CTCs进行数量测定，还可以联合多种标志物对CTCs进行形态学或生物学分析[12]。完善CTCs的检测手段可以有效地将其应用于肿瘤的早期诊断，快速评估肿瘤转移的风险，为早期乳腺癌针对性治疗提供依据[13]。不同的检测技术可以捕获不同类型的CTCs，并且它们对不同类型肿瘤细胞的敏感性和特异性也不同。常规的检测手段（如Cell Search系统）需根据血液中的细胞大小分离出所需要的细胞团，然后对这些细胞团进行鉴定，并区分具有Ep CAM+/肌酸激酶（creatine kinase，CK）阳性/4'，6-二脒基-2-苯基吲哚（4'，6-diamidino-2-phenylindole，DAPI）阳性/CD45-特征的细胞和正常细胞（表1）。