《表2 Z形管段尺寸比例：LncRNA SIL沉默促进A549细胞增殖和迁移》

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《LncRNA SIL沉默促进A549细胞增殖和迁移》

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设计并合成lncRNA SIL的SiRNA序列：SiRNA1，SiRNA2，SiRNA3以及阴性对照（NC-SiRNA），序列见表2．将合成的序列按照试剂盒说明书的要求进行转染，使用的试剂盒为锐博riboFECTTMCP，转染后立即加入TGF-β1(5μmol/L）诱导，分别在诱导后24、48h收材．使用Trizol处理细胞，利用miRNeasy MiniRNA纯化试剂盒根据说明书的要求纯化，纯化后的RNA使用Nanodrop 2000检测纯度和浓度．取2μg总RNA为模板，按照GoScript TMReverse试剂盒的说明书要求进行逆转录．通过荧光定量PCR检测lncRNA SIL的表达量．设定反应条件为：95℃300s，一个循环；95℃30s，60℃30s，40个循环．PCR完成后利用LightCycler96软件计算出Ct值，并根据公式2-△△Ct计算目标基因的表达量，内参为GAD-PH.