《表1 变量、指标及测量：玉米ZmCIPK24-2基因在盐胁迫应答中的功能研究》

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《玉米ZmCIPK24-2基因在盐胁迫应答中的功能研究》

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利用实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）分析玉米中ZmCIPK24-2基因的表达，所用上游引物为ZmCIPK24-2-Q-F3，下游引物为ZmCIPK24-2-Q-R3（表1），以玉米GAPDH基因为内参。实验所用试剂盒TransStart Green qPCR SuperMix购自北京全式金公司。加入模板cDNA 1μL，总反应体积为20μL，放入Applied Biosystem 7300仪进行反应，反应条件为95℃预变性2 min，95℃10 s，58℃20 s，72℃30 s，循环数为40个，72℃延伸30 s收集荧光，并添加熔解曲线。2次生物学重复，每次生物学重复进行3次技术重复，结果用2–ΔΔCt法计算。半定量聚合酶链式反应（RT-PCR）实验所用引物为ZmCIPK24-2-RT-F/R（表1），以拟南芥ACTIN基因作为内参。2×Es Taq MasterMix购自江苏康为世纪生物科技有限公司，反应条件为94℃预变性5 min，94℃30 s，58℃30 s，72℃延伸，扩增拟南芥ACTIN基因延伸时间为30 s，循环数为28个。扩增ZmCIPK24-2基因延伸时间为90 s，循环数为30个。