《表1 酒石黄-甲基绿体系与日落黄-甲基绿体系的吸收光谱特征》

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《甲基绿吸收光谱法同时测定饮料中的酒石黄和日落黄》

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注:λAb为吸光度为正时峰值对应波长；λF为吸光度为负时峰值对应波长

从图1可知，单独的酒石黄溶液和日落黄溶液在可见光区均有较大吸收，最大吸收峰分别位于426nm（酒石黄）和480 nm（日落黄），曲线1和曲线4表明，它们的吸收谱线有一定的重叠，当两色素共存时，因谱线的叠加，互相间有干扰，不能单独进行某一色素的测定。但当加入甲基绿溶液和p H 9.43 Tris-HCl溶液后，酒石黄与甲基绿反应生成的缔合物在可见光区产生2个明显的负吸收峰和1个明显的正吸收峰（曲线3），日落黄与甲基绿反应生成的缔合物在可见光区产生2个明显的正吸收峰（曲线5）。曲线3与曲线5和曲线2比较，均有波移现象，说明酒石黄和日落黄均可与甲基绿反应生成新物质。从曲线3与曲线5的比较可知，在Tris-HCl溶液酸度相同（均为p H 9.43）和甲基绿浓度、用量相同的情况下，酒石黄-甲基绿体系的测定波长为574 nm时，共存物质日落黄不干扰测定，而在652和450 nm处测定，日落黄会有严重干扰；对于日落黄-甲基绿体系，当测定波长为488 nm时，溶液中共存的酒石黄对其测定无干扰，当测定波长为648 nm时，酒石黄对其测定存在严重干扰。酒石黄体系和日落黄体系的线性图见图2，吸收光谱特征见表1。可知，当溶液酸度为p H 9.43时，可在574 nm测定酒石黄（日落黄不干扰），在488 nm测定日落黄（酒石黄不干扰）。该方法与已报道的文献[18-21]比较，不需吸附、分离操作，也不用解复杂的方程组，只需控制好溶液酸度，便可在不同波长下分别测定共存色素的含量。