《表1 质谱肽图/质谱二硫键检测梯度洗脱程序》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《卡式瓶多剂量重组人干扰素α2b注射液与冻干制剂的比对研究及优势分析》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

取100μL前处理后样品，加入300μL 8 mol/L盐酸胍，加入2μL 1 mol/L DTT，50℃水浴0.5 h；置室温，加入4μL 1 mol/L IAM，避光作用0.5 h；将样品置超滤管中，9 000×g离心5 min，弃滤过液，加入50 mmol/L NH4HCO3(p H 8.0）缓冲液置换，重复上述离心操作10次，用置换缓冲液将样品浓度调至0.3 mg/m L，将样品分入两管中，按15∶1(g∶g）的比例分别加入胰蛋白酶和GluC酶，胰蛋白酶37℃酶切4.5 h后冷藏，Glu-C酶25℃酶切过夜，酶切结束后分别加入甲酸终止反应，终止浓度为1%；将两管样品混合，进样检测。应用Waters BEH C18色谱柱，以含0.1%甲酸的水为流动相A，含0.1%甲酸的乙腈为流动相B，柱温65℃，上样量5μL，流速0.3 m L/min。洗脱程序见表1。质谱数据采集条件为MSE模式，毛细管电压为2 500 V，Cone电压为40 V，去溶剂气体温度为350℃，源温为120℃，去溶剂气体流速为600 L/h，扫描范围为100～2 000 m/z。用UNIFY软件对检测结果进行分析。