《表2 Ref Finder分析不同条件下黄翅绢野螟各内参基因的稳定性》

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《温度和药剂胁迫下黄翅绢野螟实时荧光定量PCR内参基因筛选》

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内参数目可参照ge Norm软件成对变异值Vn/Vn+1来确定。即当Vn/Vn+1<0.15时，则该条件下最佳内参基因的数目为n个。ge Norm软件结果表明，上述不同处理下成对变异值V2/V3均小于0.15（图7），因此，研究温度胁迫、药剂胁迫和全样品条件下基因表达分析时，需引入2个内参基因进行标准化。Ref Finder综合ge Norm、Norm Finder、Best Keeper 3个软件的基因稳定性排序结果，最终确定各基因在不同处理条件下的几何平均值，几何平均值越小，稳定性越好。因此，温度胁迫下，最终确定的内参基因为EIF4A、GAPDH；药剂胁迫下，最终确定的内参基因为ACT、EIF4A；全样品下，最终确定的内参基因为EF1α、EIF4A（表2）。在进行各条件下基因表达分析时，可引入上述基因作为内参基因。