《表2 利用Norm Finder软件计算不同条件下候选内参基因的表达稳定值》

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《菰黑粉菌实时荧光定量PCR分析中内参基因的选择及应用》

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NormFinder以每个候选基因2-ΔCt值作为输入数据，通过候选基因两两配对方式算出稳定性数值；不同小写字母表示统计学差异显著（P<0.05）；下同

使用3种软件ge Norm、Norm Finder、Best Keep‐er对菰黑粉菌融合过程各阶段的内参基因表达稳定性进行分析。ge Norm结果显示（图1C），8个基因的M值均小于0.5，表明8个基因在此阶段中表达均较稳定，具体排序为EIF-2α/60S r RNA （M=0.153）>β-Actin （M=0.186）>α-tubulin （M=0.218）>Ubiquitin （M=0.288）>GAPDH （M=0.327）>EF-1α（M=0.355）>28S r RNA （M=0.447）。Norm Finder软件选择β-actin （稳定值=0.101）为最稳定基因（表2）。而Best Keeper中，SD值小于1的有5个基因（表3），分别为GAPDH （SD=0.743）、EF-1α（SD=0.806）、Ubiquitin （SD=0.859）、α-tubulin （SD=0.963）和β-actin （SD=0.998）。因此，GAPDH、EF-1α、Ubiquitin、α-tubulin和β-actin是菰黑粉菌体外二型态转化阶段基因表达分析的合适内参基因，其中β-actin最佳。