《表1 BIOMED-2引物系统》

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《免疫球蛋白基因重排在B细胞非霍奇金淋巴瘤诊断中的意义》

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引物设计根据BIOMED-2引物系统[3]，将48条引物组合在7组引物管中，具体分组见表1。PCR总反应体系为25μL，包括PCR Mix 12.5μL，DNA模板0.5μL，100μmol/L引物0.5μL，dd H2O补足体积。PCR循环参数:95℃预变性7 min；95℃30 s，60℃30 s，72℃30 s，35个循环；72℃延伸10 min，4℃保存。取上述扩增产物10μL，行20 g/L琼脂糖凝胶电泳，4S Green Plus核酸染料染色，并于Chemi Doc XRS+成像系统上扫描并分析。结果判读:PCR扩增产物经电泳后，电泳条带清晰，边缘整齐，宽度<1 mm，条带在预期的范围以内判断为克隆性重排。如果PCR扩增产物出现片状弥散性条带，且片段大小不在引物设计所预期的范围以内，为非克隆性重排。