《表1 Real-time PCR引物序列》

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《拟南芥LTP2参与乙烯信号转导调控的初步研究》

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将样品收集至2 m L EP管中，加入钢珠，使用组织破碎仪研磨成粉末，过程中保持低温，防止样品解冻。使用微量RNA提取试剂盒提取样品RNA，根据RNA浓度调整反转录的RNA用量至500 ng。使用逆转录试剂盒将RNA逆转录为c DNA。所有样品根据OD260值（样品在260 nm波长处光的吸收值）将c DNA浓度调整一致，进行Real-time PCR。使用Real-time PCR检测LTP2以及乙烯信号转导通路基因（RTE1、ETR1、CTR1、EIN2和EIN3）、乙烯响应基因（ERF1、ERF2和ERF9）以及蜡质合成基因（CER3、CER6）的表达量。Real-time PCR反应体系：c DNA模板0.5μL、上游引物0.5μL、下游引物0.5μL、SYBR Green Master 7.5μL、dd H2O 6.0μL，共15.0μL。Real-time PCR反应程序：95℃预变性30 s，95℃变性10 s，60℃退火延伸30 s，共45个循环。试验重复3次。使用q Primer DB-q PCR引物数据库网站（https://biodb.swu.edu.cn/qprimerdb/）设计引物（表1），引物由擎科生物科技有限公司合成。