《表1 微生物计数方法适用性试验预实验的结果》

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《止得咳颗粒剂的微生物限度检查》

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试验组取已灭菌的试管，每管分装10 m L供试液，分别加入0.1 m L菌悬液，充分摇匀，注皿，每皿1m L，每一种培养基的试验组平行制备2皿，立即注入相应培养基。菌液组取已灭菌的试管，每管分装10 m L胰酪大豆胨液体培养基，其余步骤同试验组。供试品对照组:取供试液，注皿，每皿1 m L，立即注入相应培养基。需氧菌总数计数用胰酪大豆胨琼脂培养基，霉菌和酵母菌总数计数用沙氏葡萄糖琼脂培养基。待培养基凝固后，胰酪大豆胨琼脂培养基于30～35℃下培养；其中，细菌培养不超过3 d，白色念珠菌和黑曲霉培养不超过5 d，沙氏葡萄糖琼脂培养基于20～25℃下培养不超过5 d。回收比值=（试验组菌落数-供试品对照组菌落数）/菌液对照组菌落数，其范围应为0.5～2。选用金黄色葡萄球菌、白色念珠菌作为敏感菌株来进行预试验。由表1可知:1∶20的供试品溶液（每皿1 m L）组中，金黄色葡萄球的菌回收比值为0.80，在0.5～2范围内，表明采用供试品溶液稀释平皿法（1∶20供试品溶液每皿1 m L）进行需氧菌总数计数可行。1∶10的供试品溶液（每皿1 m L）组中，白色念珠菌回收比值为1.12，在0.5～2范围内，表明止得咳颗粒对真菌无抑制作用，采用常规平皿法（1∶10供试品溶液每皿1 m L）进行霉菌和酵母菌总数计数可行。根据预试验结果，初步确定止得咳颗粒中需氧菌总数的计数方法为供试品溶液稀释平皿法（1∶20供试品溶液每皿1 m L），霉菌和酵母菌总数的计数方法为常规平皿法（1∶10供试品溶液每皿1m L）。取3批止得咳颗粒剂样品，需氧菌总数按供试品溶液稀释平皿法（1∶20供试品溶液每皿1 m L）、霉菌和酵母菌总数按常规平皿法（1∶10供试品溶液每皿1 m L）进行加菌回收试验，结果见表2。