《表2 引物信息表:隔日禁食对帕金森病模型小鼠肠道屏障的保护作用及机制》

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《隔日禁食对帕金森病模型小鼠肠道屏障的保护作用及机制》


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称取20 mg空肠组织,加入500μL Trizol,45 W超声破碎50 s (工作20 s,间歇10 s)后,加入100μL氯仿,振荡混匀后室温静置10 min,4°C、11 300 r/min离心15 min,取上层水相加入250μL异丙醇,混匀后室温静置10 min,4°C、11 300 r/min离心10 min,弃上清,再分别经75%乙醇和无水乙醇清洗后离心10 min得到空肠总RNA并测定浓度,使用Prime ScriptTM RT Master Mix试剂盒进行反转录,得到c DNA,以该c DNA为模板,使用SYBR Premix Ex TaqTMⅡ进行RT-q PCR反应,使用的引物有Prkaa1、Tjp1、Ocln和Gapdh,文中用于RT-q PCR的引物序列来源于检索NCBI基因数据库,通过基因ID在Primer Bank中获得相关引物序列,详见表2。