《表3 SCo T引物序列》

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《九个中华类红肉猕猴桃品种的亲缘关系及其溃疡病抗性分析》

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提取所有猕猴桃品种的基因组DNA，稀释到50 ng/滋L，使用SCo T引物进行PCR扩增，使用的SCo T引物根据Collard和Mackill（2009)公布的36条引物序列和Luo等（2011）公布的40条引物序列进行合成。在Bio-Rad S1000 PCR仪上对所有引物进行筛选，最终筛选出扩增产物条带清晰、多态性好的10条SCo T引物（表3），用于所有DNA样品的扩增。SCo T引物扩增的20滋L反应体系包括2伊Taq PCR Mix 10滋L，DNA (50 ng/滋L）1.0滋L，10滋mol/L引物0.6滋L，超纯水8.4滋L。反应程序：94℃预变性5 min；94℃变性1 min，50℃退火1 min，72℃延伸2 min，循环35次；72℃延伸8 min。扩增完成后取8滋L扩增产物，使用2%的琼脂糖电泳分离，在凝胶成像仪上观察并拍照保存。人工统计SCo T扩增引物在琼脂糖凝胶上同一位置是否出现条带，有记为1，没有记为0。统计数据输入Excel表格，建立扩增谱带0/1矩阵数据库，使用SPSS 19.0软件进行系统聚类分析。