《表2 棕囊藻SSU r DNA基因序列》

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《北部湾棕囊藻藻华原因种分析》

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取指数生长期藻液以7000g·min–1离心1min，倒掉上清液获得藻体，应用杭州博日Bio Fast Spin植物基因组DNA提取试剂盒对棕囊藻细胞提取DNA，以提取的总DNA为模板进行SSU r DNA特征片段PCR扩增。用于扩增SSU r DNA的引物序列为:1F（5′-AACCTGGTTGATCCTGCCAGT-3′）和1528R（5′-TGATCCTTCTGCAGGTTCACCTAC-3′）（Medlin et al，1988）。PCR反应体系包括17μL dd H2O，20μL的2×Es Taq Master Mix，各1μL的正、反向引物和DNA模板。PCR反应程序:94℃预变性5min；然后94℃变性30s，56℃退火30s，72℃延伸30s，共35个循环；最后72℃延伸5min。PCR产物送到北京擎科新业生物技术有限公司进行测序，用Seq Man软件对序列进行拼接，将所得序列提交至Gen Bank，获得各序列的相应登录号（表2）。