《表1 几种采样方法对比:EGCG对热应激肉鸡脂肪沉积与肝脏抗氧化性能的影响》

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《EGCG对热应激肉鸡脂肪沉积与肝脏抗氧化性能的影响》


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肝脏样品总RNA提取均采用Trizol法,利用RNA纯化试剂盒对RNA进行纯化,用1%的琼脂糖凝胶电泳检测其浓度和完整性,并稀释定量到1μg/μL后保存于-80℃。采用反转录试剂盒(Promega)进行反转录,以β-actin作为内参基因进行定量分析,以核相关因子2(Nrf2)、脂肪酸合成酶(FAS)、类固醇调节元件结合蛋白(SREBP1)、脂多糖诱导的肿瘤坏死因子(LITAF)、核因子κB(NF-κB)为目的基因,所有引物由华大基因公司合成(表1),定量采用SYBR Green荧光染料法,在ABI 7500荧光定量PCR仪上进行定量分析,并通过计算2-ΔΔCT来衡量不同处理间基因相对表达量的差异[6]。