《表4 色谱柱柱温对多种生育酚和生育三烯酚分离的影响》

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《正相液相色谱法测定饲料添加剂天然维生素E中的生育酚和生育三烯酚的含量》

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对于正相色谱而言，分离温度是一直被忽视而又非常重要的因素。升高柱温，不仅可以加快分析速度，而且还具有提高分离效率、改善峰型、调节选择性等优点。因此，试验优化了色谱柱柱温，研究了柱温对分离效果的影响。当使用Kromasil 60-5 diol色谱柱时，β-T3、γ-T3、δ-T在色谱柱上的保留时间相近，3组分不易分离，因此使用β-T3、γ-T3、δ-T 3组分的分离度作为指标探讨柱温对分离效率的影响。由表4可知，柱温为20℃时，γ-T3、δ-T的分离度仅为1.4，2组分未得到基线分离。当温度升高时，γ-T3、δ-T的分离度增加，而β-T3、γ-T3分离度降低。柱温达到25℃时，γ-T3、δ-T分离度提高至1.6，已实现基线分离。当柱温升至40℃时，γ-T3、δ-T分离度增大至2.2。再进一步提高柱温至45℃，γ-T3、δ-T分离度未出现明显升高，而β-T3、γ-T3分离度已降低至2.1，因此，最终确定色谱柱温度为40℃。