《表2 不同温度下花青素对11S蛋白与7S蛋白的猝灭常数》

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《非共价作用对球蛋白-花青素复合物结构特性的影响》

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对于动态猝灭过程，其产物的猝灭速率常数常随着实验温度的升高而增大，方程斜率增大。本实验从图中可以看出，随温度的升高大豆蛋白与花青素复合体系直线的斜率不断降低，这说明花青素对大豆蛋白的猝灭方式为静态猝灭过程。一般普通猝灭机制对生物大分子的最大猝灭常数为2×1010L/（mol/s)[21]，而本实验猝灭速率常数明显大于2×1010L/（mol/s），由此再次验证花青素对大豆分离蛋白的荧光猝灭方式为静态猝灭。同样，在静态猝灭过程中，由于花青素-蛋白复合体系受到猝灭影响且稳定性降低使其Ksv值随着温度的增大而不断降低[22]。由图3可知，复合体系样品中Ksv可通过直线斜率的大小看出。计算结果如表2。两种球蛋白F0/F的值与花青素浓度值作图可知两者线性较好，无明显偏差。样品在298 K初始温度条件下，花青素对11s蛋白的猝灭常数Ksv为3.917×104，此数值低于花青素对7S蛋白的猝灭常数Ksv为4.433×104，此数值说明花青素对7S蛋白的猝灭程度更强。在所有样品中，当温度从298 K升高至314 K的过程中，11S蛋白复合样品的荧光猝灭常数由3.917×104降至2.651×104，7S蛋白的荧光猝灭常数由4.433×104降至1.266×104，说明两种蛋白都属于静态猝灭过程且7S蛋白猝灭程度更强。由此也可说明11S蛋白与花青素复合体系不易受温度的影响，表明了11S蛋白与花青素复合物的稳定性要强于7S蛋白与花青素复合物的稳定性。