《表1 外植体消毒灭菌剂种类及灭菌时间 (min)》

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《蓝雪花组培快繁无菌体系建立的研究》

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把剪取好的带腋芽的茎段放入烧杯，蒙上1层纱布，在流水下冲洗30min，拿到接种室无菌操作台上，先用75%酒精消毒60s，倒掉酒精，用无菌水冲洗1遍，然后按照表1的要求各处理采用不同的灭菌剂及灭菌时间进行消毒，最后再用无菌水冲洗3~5遍，外植体消毒完成。在无菌操作台上，用消过毒的剪刀和镊子对外植体进一步剪切，使外植体腋芽上端保留0.5~1cm长度，腋芽下端保留0.5~1cm长度，把剪切好的外植体接种到MS培养基的试管内，每个试管接种1个外植体，每处理接种30支试管，试验重复3次。放在培养室内进行培养，注意观察记录接种苗的污染情况、成活情况及致死情况。试管内染菌既为污染，试管内没有菌且腋芽萌动既为成活，试管内没菌但腋芽没有萌动既为致死。30d后统计计算各处理的污染率、成活率、致死率，分析得出最佳的外植体消毒方法。