《表2 标准品浓度与T/C值Tab.2 The concentration of standard and T/C value》

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《时间分辨免疫荧光层析快速检测水产品中高效氯氰菊酯方法的建立》


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根据1.3.2的方法,制备氯氰菊酯荧光检测试纸,如图3A所示。图3A中的3条试纸分别为未加样、添加0 ng/m L和128 ng/m L的荧光检测试纸,从图中可以看出未加样时,Eu标记的氯氰菊酯抗体在结合垫上,加样品溶液时在吸水纸的作用下,通过毛细管作用沿着硝酸纤维素膜层析,当样品中没有氯氰菊酯(-)时,Eu标记的抗体与T线包被的人工抗原结合,T线荧值升高,C线荧光值降低;当样品中有氯氰菊酯(+)时,Eu标记的抗体与C线包被的人工抗原结合,C线荧光值升高,T线荧光值降低。氯氰菊酯荧光检测试纸按图1的结构组合成检测卡,以方便使用。参考1.3.3的方法在对虾样品中添加0、4、8、16、32、64、128 ng的高效氯氰菊酯标准品,经提取后定容至1 m L,获得修正后的高效氯氰菊酯的标准溶液(文中所有的高效氯氰菊酯浓度都是以修正后的浓度计算)。取标准溶液3滴,滴加到检测卡的加样孔,用荧光读卡器扫描并读取荧光数值比值,如表2所示。对标准品浓度和荧光比值用ELISA Calc进行四参数拟合,拟合曲线方程y=(A-D)/[1+(x/C)^B]+D,其中A为8.81,B为1.35,C为3.02,D为0.19,R2为0.999 0;拟合曲线如图3B所示。通过做基质加标标准曲线,可以减少基质复杂成份对检测的影响,减少误差。将获得的A、B、C、D四参数输入到荧光读卡器中,就可以通过荧光读卡器检测样品中高效氯氰菊酯的浓度。