《表1 本研究所用的引物：西双版纳自然保护区球孢白僵菌的遗传多样性》

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《西双版纳自然保护区球孢白僵菌的遗传多样性》

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本研究参照李旻等（2006）、Meyling et al.（2009）和蒲顺昌等（2013a）方法中的9条引物Ba06、Ba22、Bbr07、Ba12、Ba20、Ba13、Ba21、Ba23、Bb31（表1），对240株供试菌株进行微卫星体简单重复序列锚定PCR扩增技术（simple sequence repeat PCR，SSR-PCR）扩增，25μL SSR-PCR扩增体系：正、反向引物各1μL、DNA模板2μL、PCR-Mix 12.5μL，用灭菌蒸馏水补齐至25μL。扩增程序：94℃预变性3 min；94℃变性1 min，51～58℃退火（表1）45 s，72℃延伸2 min，35个循环；72℃总延伸8 min，扩增完成后进行2.5%琼脂糖凝胶电泳检测，选取条带单一清晰的样品，进行变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（polyacrylamide gel electrophoresis，PAGE），通过硝酸银染色检测SSR-PCR产物的扩增效果及其特异性，把胶板的胶面向上在硝酸银染色染色液中染色10 min，立即放置于蒸馏水中漂洗2 min，然后置于显色液中至条带显色清晰，用相机进行拍照。