《表1 ELISA实验加样位置及加样量》

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《转Bt基因南林895杨对美国白蛾抗虫性研究》

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采用EnviroLogix公司（美国）的ELISA试剂盒测定各株系的Bt毒蛋白含量，取待测样品5μL用蛋白提取液稀释至100μL待用，根据表1中的位置和加样量在96孔板内添加标准品、空白对照及待测样品，每孔终体积为50μL（共设置7个梯度，每个梯度3次重复），将96孔板封膜并放入密封袋中，37℃水浴30 min，除去密封膜弃掉液体后加满洗涤液清洗后甩干，除去空白对照外，每孔加入酶标试剂50μL，封膜密封后37℃孵育30 min，重复洗涤5次后甩干，加入显色剂37℃反应15 min后加入终止液。在酶标仪（Biorad iMark）上测定450 nm吸光度，并以空白孔调零计算标准品和样品的OD值，绘制Bt蛋白的标准曲线。