《表2 非洲绿猴各组织器官的IFITM3表达情况》

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《非洲绿猴IFITM3基因的克隆及其组织特异性表达差异》


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本研究克隆了非洲绿猴的IFITM3基因,发现其基因和蛋白序列与灵长目动物和哺乳动物具有高度相似性和同源性(图2,3,4),证明非洲绿猴IFITMs也会在机体的免疫保护过程中发挥作用。非洲绿猴的IFITM3同样存在五个高度保守的特异性结构域和CD225保护区。IFITMs家族的CD225结构域是成员共享的一个高保守保护性区域,存在于内膜TM1和胞CIL区,该结构域对于发挥IFITMs的功能十分重要[14]。CSS Palm 2.0软件分析发现,AGM的IFITM3蛋白存在高度保守的泛素化、棕榈酰化位点和YxxФ特异性结构(图5)。这些特异性位点对于IFITM3的靶向输送具有至关重要的作用。研究表明,IFITMs主要表达于细胞膜表面、溶酶体、内质网、胞内囊泡等,其亚细胞定位与IFITMs的功能、类型及细胞种类相关[2,6]。在本研究中,IFITM3在非洲绿猴的心脏、肝、脾、肺、肾、皮肤、脑、淋巴结中均有表达,且其RNA在脾、肾和皮肤显示出高丰度(图6),免疫组化结果与Real-time PCR相似,在脾淋巴细胞、肾小球和肾小管上皮细胞、腹股沟淋巴结细胞等组织器官中检测到较强的IFITM3蛋白信号(图7,表2),该结果与张玉娟等[15]所研究的IFITMs在猪组织器官中的表达和亚细胞定位相似。IFITMs是一种内源基因,因此,如荧光实时定量PCR结果所示,其基因和转录后产物RNA广泛存在于非洲绿猴的各个组织器官中,但脾、肾和皮肤中的RNA丰度最高。通过转录后翻译和转运,IFITM3蛋白质则主要集中到非洲绿猴的免疫器官中,如脾、淋巴细胞、肾等(图7),这些组织器官在病原体入侵时发挥免疫功能,启动机会的免疫响应。本研究的结果显示,存在于免疫器官的IFITM3蛋白含量明显高于其他脏器,侧面说明IFITM3作为机体重要的免疫防御武器的原因所在。