《表2 5种病毒的引物信息》

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《2015—2019年广西部分猪场病死猪5种病毒的抗原检测》

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利用特异性引物，对提取的样品RNA进行RT-PCR扩增。反转录体系10μL:RNA模板7μL，5×Prime-ScriptTM缓冲液2μL，RT Enzyme Mix0.5μL，下游引物0.5μL。反转录条件：42℃40 min，94℃5 min，反应产物于-20℃保存备用。PCR扩增体系25μL:2×Taq PCR Master Mix12.5μL，上、下游引物各0.5μL，反转录产物（c DNA)3μL，ddH2O 8.5μL。PCR扩增反应条件：94℃预变性5 min；94℃变性30 s，按表2退火温度退火30 s，72℃延伸45 s，共35个循环；72℃延伸10 min。反应结束后取10μL PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测，然后在凝胶成像系统上观察。