《表2 柑橘中miRNA及其验证的靶基因》

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《microRNA参与柑橘生长发育和抗逆的研究进展》


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miRNA的功能与其靶基因的功能息息相关,因此对靶基因的预测和验证非常必要(表2)。靶基因的预测常利用生物信息学的方法。目前已开发出多个植物miRNA靶基因预测的算法,如psRNAtarget(Dai et al.,2018)、WMD3(Schwab et al.,2006)和ViennaRNA(Lorenz et al.,2011)等在线软件。利用生物信息学软件对靶基因进行预测时遵循以下规则(Allen et al.,2005;Schwab et al.,2005)——(1)miRNA和候选靶基因间不配对碱基不超过4个(G-U算0.5个不配对);(2)miRNA与靶基因的靶定区不能有多于2处相邻位点的错配,且在miRNA5′端第2~12碱基位点不得有相邻错配位点;(3)第1~12位点不允许超过2.5个错配,第10~11碱基位点不能出现错配;(4)miRNA和靶基因复合体最小自由能要≥miRNA与其最佳互补序列结合时自由能的72%。