《表2 ISSR引物:苏州东山茶树种质资源遗传多样性的ISSR分析》

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《苏州东山茶树种质资源遗传多样性的ISSR分析》


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茶树ISSR-PCR反应体系总体积为20μL,PCR组分:2μL 10×PCR buffer(不含Mg2+),1.6μL Mg2+(25 mmol·L-1),1.6μL dNTP(2.5 mmol·L-1),引物0.8μL(10 mmol·L-1),0.2μL Taq酶(5 U·μL-1),1μL模板DNA(50 ng)。扩增程序:94℃预变性7 min;94℃变性1 min,退火45 s,72℃延伸90 s,35个循环;72℃延伸7 min。ISSR-PCR引物来自加拿大哥伦比亚大学(UBC)提供的100条序列,结合相关研究报道[7,19—22],筛选出12条引物(表2),由上海生工生物工程有限公司合成。PCR产物用1.5%琼脂糖凝胶120 V电泳1 h,凝胶成像系统检测。