《表1 秋水仙素不同加倍方法加倍率统计》

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《玉米单倍体诱导、加倍技术及相关机理探讨》

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DH育种规模化选育过程中，单倍体的人工加倍是目前应用最广泛的方法，如化学加倍、气体加倍、体细胞融合等加倍方法。秋水仙素加倍是化学加倍中最常见的方法，主要包括浸种法、浸芽法、浸根法、注射法和组织培养法。浸种法操作简单，而且浸种后胚芽突破种皮，可以淘汰芽尖呈紫色的准单倍体，提高鉴别率，减少下一步工作量，是诱导后比较常用的加倍方法。浸根和浸芽法处理过程比较复杂，需要育苗、移栽，对田间管理要求较高，管理不善，幼苗成活率很容易降低，而且所需的秋水仙素加倍液较多，需要做好充分的防护措施。注射法不需要育苗、移栽，操作简便且用量少，但需要对田间每一单倍体植株进行注射，劳动强度较大，由于田间植株长势不一致，对注射的技术要求很高。组织培养加倍是通过培养基渗入的途径，对单倍体花药、小孢子等愈伤组织进行加倍处理，由于实验条件控制精确，使得实验结果重复性强。对国内外研究中利用秋水仙素对玉米加倍的不同方法进行统计发现（表1），组织培养法加倍率最高，由于实验环境要求较高，操作程序复杂，组织培养加倍法在DH育种中的应用受到环境条件的限制。虽然注射法的加倍率相对较高，但浸根和注射法对植株的伤害较大，使得浸种法和浸芽法在单倍体育种中的应用较为常见。