《表1 不同秋水仙素处理组合对毛竹种子四倍体诱导的影响(1)》

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《毛竹四倍体诱导及初步鉴定》

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（1）同列不同小写字母表示差异显著（P<0.05）。下同。

由于植物多倍体中的细胞含有倍增的染色体数，其细胞中的总DNA含量也相应地倍增，通过流式细胞仪可以较为简便地实现多倍体的鉴定。首先从已知的水稻的C值数据库（http:∥www.ricedata.cn/variety/）查得‘日本晴’DNA含量为2C=1 pg，而后利用公式计算待测样品的C值=（待测样品的平均峰值÷‘日本晴’水稻的平均峰值）×1 pg。由图1可知，水稻‘日本晴’的DNA含量峰值位于13道的位置左右，二倍体毛竹DNA含量其峰值约为50道，四倍体植株的DNA含量峰值位于100道的位置左右，说明诱导得到的植株细胞核DNA含量有成倍增加，通过C值的换算公式，可以确定为四倍体。如果DNA含量在50与100道处都有峰值，则表明植株为混倍体（王丽艳等，2004；张虹等，2017）。分别用0.1、0.5、1、2 g·L-14种不同浓度的秋水仙素溶液浸泡经预处理的毛竹种子24、48和72 h后，诱导结果见表1。诱导处理1 080粒毛竹种子，栽培后共得到204株植株，其中具有下胚轴膨大现象的种苗有92株（图2），经流式细胞仪检测倍性，除去出现双峰的混倍体植株，共获得15株四倍体植株。由表1可知，当秋水仙素浓度为0.5 g·L-1、处理时间为72 h，及秋水仙素浓度为1 g·L-1、处理时间为24 h时，四倍体的诱导率分别达4.44%和5.56%，诱导效果最佳。而用低于0.1 g·L-1浓度的秋水仙素处理种子时无明显诱导效果，说明诱导毛竹多倍体需要一定的秋水仙素浓度。当秋水仙素浓度≥2 g·L-1，随着浸泡作用时间增长，植株的存活率及多倍体诱导率都明显下降。