《表1 噬菌体展示多肽序列及重复情况》

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《基于纳米磷脂盘包被CD44v6的特异性多肽筛选》

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第4轮筛选结束后，对随机的30个噬菌体克隆进行测序分析。根据噬菌体随机十二肽展示文库手册中的方法对测序结果分析，寻找限制性内切酶位点KpnⅠ以及EgalⅠ的酶切位点GGTACC和CG-GCCG，从而获得插入DNA序列，再利用M13噬菌体专属密码子表进行翻译，最终获得噬菌体所展示的12肽序列。表1展示了所挑选30个噬菌体所携带的多肽序列。30个噬菌体克隆共携带6条多肽序列，分别命名为:NP-1（HNTPSVRHFYKQ）、NP-2（HNTYVTSFHRNY）、NP-3（WQKPSHIPFNAS）、NP-4（QTALYSKPGPPV）、NP-5（ELYYHNTDIESQ）、NP-6（YHWEAYSTTPIS）。6条序列重复中重复的噬菌体克隆分别为8次、12次、4次、3次、2次、1次。重复次数更多的序列体现出筛选过程中的富集效应，相较重复少的序列亲和力可能更好，因此也是后续验证的重点。经比对发现NP-1和NP-2、NP-2与NP-5分别包含有一个重复的三肽基序HNT，可能是多肽结合于靶蛋白的关键氨基酸位点。