《表3 各试验材料SSR正交实验打分结果Table 3 Scores of orthogonal experiment for different test material》

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《酸枣SSR-PCR反应体系优化》

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注:a、b、c、d分别指LW1、LW2、LW23，“三星”。Note:a，b，c，d refers to the LW1，LW2，LW23，‘Sanxing’respectively.

对4份材料在不同SSR-PCR反应体系下的扩增效果（图2~5）进行量化打分，将目标条带清晰、特异性好且没有引物二聚体的计最高分16分，效果最差的记为1分。根据得分情况进行统计分析，结果见表3。可知，酸枣LW1的基因组DNA扩增效果较好的反应体系依次为8号、6号和11号，酸枣LW2的基因组DNA扩增效果较好的反应体系依次为6号、7号、1号，酸枣LW23效果较好的依次为5号、6号和1号，大枣“三星”的效果较好的依次为5号、1号和15号。在3个酸枣品系中，6号组合均表现出较好的扩增效果，在16个组合中3个酸枣品系的平均值最高，所以6号组合为酸枣的最佳反应体系，即总体系20μL，其中DNA模板100 ng，Mg2+浓度1.25mmol·L-1，dNTPs 0.3 mmol·L-1，引物浓度0.5μmol·L-1，Taq DNA聚合酶1.5U；大枣“三星”的效果最佳的组合为5号，即总体系20μL，其中DNA模板100 ng，Mg2+浓度1.00mmol·L-1，dNTPs 0.35mmol·L-1，引物浓度0.4μmol·L-1，Taq DNA聚合酶2.0 U。酸枣与大枣对比，二者最佳体系不同，除DNA模板用量相同外，在Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq DNA聚合酶用量上均有一定差异。