《表3 各衍生物偶极距:柱前衍生高效液相色谱法测定山黧豆中β-二氨基丙酸的方法研究》

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《柱前衍生高效液相色谱法测定山黧豆中β-二氨基丙酸的方法研究》


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用液相色谱分离光度检测法测定β-ODAP,其中,衍生化过程是必不可少的。ODAP是典型的非蛋白质脂肪族氨基酸,几乎没有紫外吸收,液相色谱仪通常配备的紫外检测器无法直接测定β-ODAP;同时ODAP具有强极性,在碳柱上没有足够保留,并且β-ODAP和其同分异构体α-ODAP极性相差太小(Gaussian 09A02计算:β-ODAP和α-ODAP的偶极距分别为2.38和3.46Debye),很难分离。为此,先采用Gaussian 09计算化学方法优化拟选衍生试剂与ODAP衍生产物的最低能量结构,计算其偶极矩,再用实验加以证实和筛选,计算结果如表3所示。从表3可知,ODAP的两种异构体与拟选衍生试剂的衍生产物的偶极距均发生变化且之间的差值大大增加,可以推测两种异构体在碳柱上保留时间的差异性会增加,两种异构体可望得到分离。