《表1 引物设计：外源蔗糖对离体条件下换锦花小鳞茎发生的影响》

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《外源蔗糖对离体条件下换锦花小鳞茎发生的影响》

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基于本课题组对换锦花气培过程中鳞茎的转录组测序数据及注释文件结果（待发表数据），筛选得到激素代谢、糖代谢、损伤响应及腋芽形成等途径相关基因共9个。按照定量引物设计要求，利用Beacon Designer 7.0设计引物。根据蒋婷婷等（2015）对石蒜属植物实时荧光定量PCR内参基因的筛选结果，选择表达量稳定的Actin作为内参基因（表1）。用RT-qPCR试剂盒TB GreenTM Premix Ex TaqTM(TaKaRa）进行20μL体系RT-qPCR。在PCR反应管中加入10μL TB Green，上下游引物各0.8μL，7μL稀释50倍的c DNA模板，用双蒸水补至20μL。反应程序：95℃2 min；95℃5 s，60℃30 s，40个循环。应用荧光定量PCR仪CFX Connect Real-Time System(BIO-RAD）及进行PCR扩增，应用其配套软件BIO-RAD获得循环数Cq值。试验设置3次重复。