《表4 不同基础培养基下的VEGF-MA质量》

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《CHO细胞表达抗血管内皮生长因子单克隆抗体工艺优化》

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首先选取14种细胞培养中常用的基础培养基，种类如表1所示。分别在不同的培养基中培养CHO细胞，考察抗VEGF抗体的生产性能，目的在于选择最优的基础培养基。目的蛋白产量是体现生产性能的主要指标，在上述14种基础培养基中培养CHO细胞7 d后，发酵液中的VEGF-MA浓度如图1所示。从中可以看出，最优的批次所使用的基础培养基为5#，VEGF-MA的产量为0.70 g/L。此外，使用7#、9#和11#三种基础培养基时，也可以获得较高的目的蛋白产量（0.60 g/L以上）。除目的蛋白产量外，目的产物质量也是体现生产性能的重要指标。目的产物质量可以依靠其电荷异质性、糖基化组分和蛋白纯度三个指标判断。通常情况下，电荷异质性≤35.0%、糖基化组分处于50.0%～60.0%之间以及蛋白纯度≥85.0%的目的产物被认为质量合格。在上述14个批次结束时刻的发酵液中分离纯化抗VEGF抗体，测定其电荷异质性、糖基化组分和蛋白纯度，结果如表4所示。可以看出，5#基础培养基条件下的VEGF-MA质量较高。综合目的产物产量及质量，选用5#培养基，即ActiCHO P Powder CD，作为后续研究中所用的基础培养基。