《表5 正交试验16个组合的评分结果》

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《华山松SSR-PCR反应体系优化》

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由图3和表5可知，16个处理中，处理1～8和处理12的条带较弱，评分较低，尤其是处理1几乎无条带，处理9、14、15和16的条带较亮，评分较高，其中又以处理14的评分最高。R反映各因素对华山松SSR-PCR反应体系的影响程度，R越大，说明该因素对反应体系的影响越显著。正交试验结果（表6）显示，RA>RD>RB>RC，因此，4个因素影响华山松SSR-PCR反应体系扩增效果的主次顺序为：A>D>B>C，即引物用量>DNA模板用量>dNTPs用量>Taq DNA聚合酶用量，说明引物用量对华山松SSR-PCR反应体系扩增效果的影响最大，Taq DNA聚合酶用量的影响最小。A因素4个水平的扩增效果排序为：A4>A3>A2>A1，即引物用量为0.35μL时扩增效果最佳；B因素4个水平的扩增效果排序为：B2>B4>B3>B1，即d NTPs用量为1.80μL时扩增效果最佳；C因素4个水平的扩增效果排序为：C2>C1>C4>C3，即Taq DNA聚合酶用量为1.20μL时扩增效果最佳；D因素4个水平的扩增效果排序为：D2>D3>D4>D1，即DNA模板用量为1.00μL时扩增效果最佳。综上所述，最优水平组合为A4B2C2D2，即引物用量0.35μL、dNTPs用量1.80μL、Taq DNA聚合酶用量1.20μL、DNA模板用量1.00μL。