《表5 cDNA合成的反应体系》

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《赤红球菌SD3全基因组测序及其热休克蛋白DnaK的表达分析》


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将赤红球菌SD3单菌落挑至LB液体中,35℃、200 r/min摇床培养至对数生长期。取1 mL菌液分别转接不含有机溶剂(对照)、含有0.2%(V/V)甲苯和含有0.08%(m/V)苯酚的LB液体中,35℃、200 r/min摇床培养至OD值为0.8~1.0,离心收集菌体沉淀。按照细菌总RNA提取试剂盒(DP430)说明书提取总RNA。使用Hi Script TM cDNA一链合成试剂盒合成c DNA,反应体系(表5)。然后反应体系在25℃处理5 min,使逆转录引物与RNA充分结合;接着在50℃下进行逆转录反应15 min,最后在85℃处理5 min对酶进行灭活。